一起金黄色葡萄球菌食物中毒的病原学分析

　　

　　唐燕

　　

　　（苏州工业园区疾病防治中心，江苏苏州215021）

　　

　　摘 要：目的：对食物中毒中所产生的致病菌进行检测。方法：根据国家标准，使用增菌培养基、选择性培养基、显 色培养基和细菌生化鉴定系统分离和鉴定致病菌。结果：3份样均检出金黄色葡萄球菌，其中符合鉴定结果的概率为99%。 结论：引起食物中毒的致病菌为金黄色葡萄球菌。

　　

　　关键词：食物中毒；Baird-Parker琼脂平板；金黄色葡萄球菌

　　

　　金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）属于革兰氏阳 性菌，是常见的食源性致病菌，在自然界中广泛分布，通过 空气及接触等传播，可对食品造成污染叫在条件适宜的情 况下，会产生肠毒素，导致多种毒性蛋白的产生，诱发食物 中毒及金黄色葡萄球菌类毒血症病症。金黄色葡萄球菌多存 在于环境中以及人与动物的皮肤粘膜上，正常人的带菌率为 30%〜50%,人手上有14%〜44%的带菌率。实验室研究 中，开展食物中毒样本的病原菌检验已成为公共卫生问题的 重要内容。本实验釆用Baird-Parker琼脂平板和VITEK2全 自动细菌生化鉴定仪相结合，开展病原菌病原学检验，可作 为传染源控制及致病菌控制的依据

　　

　　1材料与方法

　　

　　1.1材料

　　

　　1.1.1培养基与试剂

　　

　　亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）,缓冲蛋白踪水（BPW）, 7.5%NaCl肉汤，志贺氏菌增菌肉汤，科玛嘉沙门氏菌显色 培养基、Baird-Parker琼脂平板、脑心浸出液肉汤、冻干血浆、 XLD培养基、血琼脂平板、HE琼脂，北京路桥技术有限公司； GP革兰氏阳性细菌鉴定卡，购自美国bioMerieux. Ine；以 上所用试剂均在有效期内㈣。

　　

　　1.1.2检验仪器

　　

　　恒温隔水式培养箱（型号为HP-9270）；全自动细菌 生化鉴定仪器（型号为VITEK2）；生物安全柜（型号为 HFsafe-1200）«

　　

　　1.2菌株分离与鉴定

　　

　　沙门氏菌、志贺氏菌及金黄色葡萄球菌的检测主要根据 《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》（GB 4789.4—2016）、《食品安全国家标准食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》（GB 4789.10—2016）及《食品安全 国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验》（GB 4789.5— 2012）,应用VITEK2全自动细菌生化鉴定仪开展细菌生化 鉴定。

　　

　　2结果与分析

　　

　　2.1流行病学调查

　　

　　迷客夏圆融二店是一家饮品店，2020年3月17日某家 单位的10名员工在食用了迷客夏的饮品后相继出现呕吐、 腹泻等症状。首发病例于3月17日13： 40首次出现恶心、 呕吐（3次）、腹痛、腹泻（3次）。该病例于17日14： 40到 九龙医院就诊。余9名病例的主要临床表现为恶心、呕吐、 腹痛、腹泻和发热等。经抗菌素和输液治疗，现已转归良好。 在中心接报完成后，开展现场调研，并进行釆样干预，釆集 3种口味的朵朵云样品送检。

　　

　　2.2分离与增菌培养

　　

　　3份样品称量后，分别添加至缓冲蛋白豚水（BPW） [3], 7.5%NaC 1及志贺菌增菌肉汤中，均质，于36。（3培养18h； 将完成增菌后的上述样品，分别接种到科玛嘉沙门氏菌显色 平板、Baird-Parker琼脂平板、血琼脂平板、HE琼脂平板 和XLD琼脂平板，于36 °C培养24 h。结果显示，血琼脂 平板上可见金黄色、圆形、不透明的可疑金黄色葡萄球菌菌 落，Baird-Parker琼脂平板上可见圆形、光滑、凸起、湿润、 直径为2 mm的可疑金黄色葡萄球菌菌落。在初分离培养中, 由于样品中存在较少的菌量，会导致遗漏问题的产生，因此 需要应用增菌培养物开展再分离培养。在血琼脂平板上，3 份样品均呈现金黄色，形状为圆形，不透明，表明光滑，周 围部位存在溶血圈的可疑菌落生长。在Baird-Parker琼脂平 板上有圆形，光滑度较高，湿润度较高，凸起，直径为2 mm, 颜色为灰色，边缘为淡色，周围存在浑浊带，外层部位存在 透明带的可疑菌落生长。其余平板均无可疑菌落生长。

　　

　　2.3纯培养

　　

　　在Bahd-Paiker琼脂平板上挑取单个菌落分纯在血琼脂平 板上，并挑^血琼脂平板的可疑单菌落，置36。。培养24h。 2.4初步鉴定

　　

　　涂片镜检：3份样品的镜检结果均为革兰氏阳性球菌， 以葡萄球形状排列，无芽抱，无荚膜。

　　

　　2.5血浆凝固酶试验鉴别

　　

　　在血琼脂平板上挑选单个菌落，转接至5 mL脑心浸出 液培养基试管中，于36。（3培养24h。吸取0.5 mL无菌生理 盐水到冻干血浆西林瓶中，摇匀，再加入脑心浸出液培养 物0.3mL,混合均匀后于36。（3培养，每隔0.5 h观察1次， lh后出现凝固现象，则为血浆凝固酶阳性。在血琼脂平板 上进行纯培养物的挑选，用0.45%氯化钠液制备成0.68麦氏浓度的菌悬液，接种GP革兰氏阳性细菌鉴定卡，生化鉴 定应用VITEK2全自动细菌生化鉴定仪，鉴定结果为金黄色 葡萄球菌，在3份样品中，金黄色葡萄球菌均存在一致性的 生化结果。

　　

　　3结语

　　

　　金黄色葡萄球菌肠毒素可耐受100 °C煮沸30 min而不 被破坏，并能抵抗胃肠道中蛋白酶的水解作用。若人们食用 了金黄色葡萄球菌所污染的食物，可引起腹泻及呕吐等问 题，诱发急性胃肠炎四。据郑艳敏等报道，2014—2018年 苏州市217次食源性疾病暴发事件中，7.37%为金黄色葡萄 球菌诱发可导致以呕吐和腹泻为主的急性胃肠炎症状闵。本 次食物中毒事件中极有可能存在食品间交叉污染的情况，应 当予以重视，并对本地区的食品生产经营者加以引导。

　　

　　参考文献

　　

　　[1]刘保光，谢苗，董颖，等.金黄色葡萄球菌研究现状[J]. 动物医学进展 ^021,42(4):128-130.

　　

　　[2]马敏.一起金黄色葡萄球菌肠毒素食物中毒调查分析 [J],河南预防医学杂志,2020,31(12):931-933.

　　

　　[3]郑艳敏，滕臣刚，张梦寒，等.2014—2018年苏 州市食源性疾病暴发事件流行特征分析[J],现代预防医 学,2020,47(2):215-218.

　　

　　[4]郑剑，周伟艳，胡丹标，等.一起金黄色葡萄球菌食物 中毒检测与分析[J],中国卫生检验杂志,2016,26(23):3464-3466.

　　

　　[5]仇广翠，孙明忠，金浩.220株金黄色葡萄球菌的临床分 布特点及耐药性分析[J],中国实验诊断学^016^0(2):269-271.