液相色谱一串联质谱法测定蔬菜中的灭蝇胺

　　

　　李 莉，刘苗苗，丁宗博，王海波，张兴龙，魏亦山

　　

　　（青岛市农产品质量安全中心，山东青岛 266100 ）

　　

　　摘 要：本研究在标准方法《蔬菜中灭蝇胺残留量的测定高效液相色谱法》（NY/T 1725-2009 ）的基础上，省掉净化 步骤，通过提取与浓缩，建立液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中的灭蝇胺分析方法。结果表明，采用简化后的前处理方法 测定7种不同种类的样品，在0. 01 - 1. 00 mg/L范围内，加标回收率为78% ~ 107%,标准偏差为2. 8% ~ 5.5%,其回收率 和精密度都能达到分析检测要求。运用该方法对实际样品进行分析，操作简单，准确度高，可为蔬菜中灭蝇胺的批量快速 检测方法研究提供数据参考。

　　

　　关键词∶液相色谱-串联质谱法;蔬菜;灭蝇胺

　　

　　灭蝇胺（Cyromazine）是一种三嗪类化合物，属于强内吸 性昆虫生长调节剂，极性强，具有触杀和胃毒作用。目前， 灭蝇胺被广泛用于亜豆、菜豆、黄瓜和茄子等农作物的双翅 目昆虫病虫害防治中团。

　　

　　《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2019）図规定，灭蝇胺残留量指定的检验方法为《蔬 菜中灭蝇胺残留量的测定高效液相色谱法》（NY/T 1725— 2009） [3]（以下简称标准方法），但该方法的前处理步骤烦琐、 溶剂消耗量大，耗时长，不适用于大批量检测工作。因此， 本研究通过简化前处理步骤，建立了快速检测灭蝇胺残留的 样品前处理方法，并釆用高效液相色谱-串联质谱法分析测 定，为不断探寻更优质、更快速的检测方法具有重要的指导 意义[4_5]o

　　

　　1材料与方法

　　

　　1.1仪器和试剂

　　

　　Agilent technologies 6460 Triple Quad LC/MS,配有 ESI 源，美国安捷伦公司；电子天平，奥豪斯有限公司；高速组 织捣碎机，德国IKA公司；旋转蒸发仪，德国KNF。

　　

　　灭蝇胺标准品，浓度为1 000 ng/mL,购自农业部环境 质量监督检验测试中心（天津）；乙睛、甲醇、乙酸铉、甲酸、 甲酸铉（色谱纯）；实验用水为屈臣氏蒸馋水。

　　

　　大白菜、番茄、葱、蒜、香菇、西葫芦和山药，均购自 于市场，经检测均为阴性样品；结球甘蓝为能力验证剩余样 品（已知添加浓度）。

　　

　　1.2标准溶液配制

　　

　　①灭蝇胺标准储备液：移取1 000 mg/L灭蝇胺标准溶 液ImL于100 mL容量瓶中，用乙腊稀释至刻度，浓度为 10 mg/L。②灭蝇胺标准中间液：移取ImL标准储备液加 入乙腊，定容至10 mL,配制成1 mg/L标准中间液。③灭 蝇胺标准工作液：吸取100 gL标准中间液，加入900 gL空 白基质，配制成0.1 mg/L的基质标液。

　　

　　1.3液相色谱-串联质谱仪器条件

　　

　　1.3.1色谱条件

　　

　　色谱柱：Infinity Lab Proshell 120 EC -C18 （2.7 pirn,

　　

　　3.0x100 mm）；流动相：A-水（含5nmol/L甲酸铉+0.1%甲 酸）、B-甲醇；梯度洗脱程序见表1,流速为0.4mL/min, 进样体积2gL,柱温40 °C。

　　

　　1.3.2质谱条件

　　

　　离子源：AJS-ESI；扫描方式：正离子扫描；干燥气温 度：285 P；干燥气流速：10 L/min；鞘气温度：375 °C； 鞘气流速：12 L/min；雾化器35 psi；监测模式：多反应监测 模式（MRM）；定量/定性离子对：167.1/85.K 167.1/68.1« 1.4样品前处理

　　

　　准确称取粉碎混匀后的试样20 g（精确到0.01 g）,加 入乙酸铉-乙腊（1+4）溶液均质、冲洗、过滤，并定容至 100 mL具塞比色管中。用移液管准确移取10 mL提取液至 圆底烧瓶中，旋蒸浓缩至只含水的溶液（冷凝装置无液滴滴 下）。将只含水的溶液转移至带刻度线的10 mL样品小管， 加水定容至5mL,混匀过0.22呻滤膜，上液相色谱-串 联质谱仪测定。

　　

　　与标准方法相比，省去了净化步骤，仅保留提取和浓缩 步骤。

　　

　　1.5加标回收试验

　　

　　选取大白菜、番茄、葱、蒜、香菇、西葫芦和山药7种 空白基质，添加0.1 mg/L的标准溶液，平行测定6份，按 上述前处理方法处理后上机测定，计算回收率和精密度。

　　

　　2结果与分析

　　

　　2.1线性范围

　　

　　研究分析发现，灭蝇胺在0.01〜1.00 mg/L范围内有良 好的线性关系，线性方程为尸16.311 8x（其中，'为响应值； x为灭蝇胺的浓度，mg/L）,线性相关系数r为0.999 4。

　　

　　2.2定量限

　　

　　选取大白菜、香菇、蒜空白基质，添加浓度为0.010mg/L 的标准溶液，用上述方法平行测定6次，测得其平均回收率 分别为 92%、72%、75%, RSD 分别为 4.6%、5.4%、7.6%, 其准确度和精密度符合检测要求，因此，将0.01 mg/L作为 此方法灭蝇胺的定量限。

　　

　　2.3回收率和精密度

　　

　　7种不同基质的加标回收和精密度结果见表2。从表2 可以看出，在7种不同种类的基质中，灭蝇胺的回收率比较 稳定，在78%〜107%范围内，符合准确度要求；同时， RSD在2.8%〜5.5%,符合精密度要求，满足检测分析要求。

      2.4实际样品分析

　　

　　将能力验证的样品结球甘蓝(已知添加灭蝇胺的浓度为

　　

　　0.140 mg/L)用上述方法进行前处理后上机测定，测得其结 果为 0.147 mg/L。

　　

　　3结论

　　

　　本研究通过改进标准方法中的前处理步骤，仅通过提取 和浓缩，省略了净化步骤，建立了测定蔬菜中灭蝇胺残留量 的液相色谱-串联质谱方法。该方法简单，快速、准确可靠, 既可满足蔬菜中灭蝇胺残留的技术要求，又可用于大量样品 的快速检测。但是，由于省掉了净化步骤，提取出的基质会 比标准方法更复杂，对色谱柱和仪器的污染程度会更高一 些。因此，在平时的检测过程中，要更加注意色谱柱的冲洗 和仪器的维护保养。

　　

　　参考文献

　　

　　[1]刘瑛，余晟，于峰，等.灭蝇胺的毒性研究[J].农药,2000, 39(9):25-33.

　　

　　[2]国家卫生健康委员会，中华人民共和国农业农村部，国 家市场监督管理总局.食品安全国家标准食品中农药最大残 留限量：GB 2763—2019[S],北京：中国农业出版社＞2019.

　　

　　[3]中华人民共和国农业部.蔬菜中灭蝇胺残留量的测定高 效液相色谱法:NY/T 1725-2009[S].北京：中国农业出版社2009.

　　

　　[4]赵馨.QuEChERS方法在HPLC测定血豆中灭蝇胺残 留量的应用研究[J],福建农业科技＞2020(8):7-12.

　　

　　[5]徐军，张盈，董丰收，等.超高效液相色谱-串联 质谱法快速检测菜豆及土壤中的灭蝇胺残留[J].农药学学 报,2012,14(6):654-658.