□ 热比古丽·沙吾提 王甜 新疆维吾尔自治区水产科学研究所 农业部西北地区渔业资源环境科学观测试验站

摘　要：在水质环境的监测中，微生物检测是一项重要内容。与化学检验不同，水质微生物检验是一个不断变化的生物体。在微生物检验中由于检测结果的准确性受多方面因素的影响，因此,只有加强对微生物检验质量的控制，才能确保检测结果准确无误。

关键词：水质微生物检测 影响因素 质量控制

引言

本文从人员、环境、仪器设备、培养基、样品的采集这五个方面阐述了影响水质微生物检验的相关因素，并从各个环节着手，希望通过加强水质微生物检测的质量控制来提高微生物检验工作的质量，进而保证检验检测结果准确可靠。

1 常见水质微生物检测结果的影响因素

1.1 人员

微生物检验人员上岗前应接受与其所承担的工作任务相适应的培训，并对培训技能进行资格确认后取得上岗证。检验人员需熟悉所承担检验项目的相关标准、规范和操作规程，能独立负责并正确评价检测结果;熟练掌握所用仪器设备的性能和使用方法，并严格按照操作规程进行操作;还应熟悉微生物检验检测安全操作知识和消毒知识。

1.2 仪器设备

微生物实验室的仪器设备应以一台一档的方式建立档案，档案则应当包含其基本信息。此外，每台仪器应安排保管人员负责仪器设备的保管和日常维护。目前，微生物实验室常用的仪器设备包括：冰箱、培养箱、高压灭菌器、超净工作台、显微镜、温度计、紫外灯等。使用仪器设备的人员必须熟悉和掌握操作规程，防止操作不当造成事故。

1.3 环境设施

水质微生物检测很大程度上会受环境影响，因此需要做到如下几点。第一，保持实验室内良好的通风和无尘状态——为减少灰尘、大气流、温度变化等因素产生的影响，安装空调是解决这些影响因素的最佳方式之一。第二，每次接种前，需将无菌室用紫外灯消毒30分钟，消毒完毕后关闭紫外灯，等待30分钟后人员方可进入无菌室;人员进入无菌室后需打开超净工作台后方可工作;工作完毕后需再次将紫外灯打开杀菌。第三，微生物检验室应尽量避免外来人员出入，以减少空气流动，避免不洁空气的带入。第四，在样品移至无菌室前，须先将采样瓶体外壁用酒精棉擦拭，然后换上无菌工作服和拖鞋，戴好手套、口罩等，再将其移至无菌室内，从而避免与实验室内部环境发生交叉污染。第五，无菌室应定期进行沉降菌的测试和环境的验证，环境合格后才能开展检测工作。沉降菌的测试方法[1]为，采用大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)配制的培养皿采样后，置于30~35℃培养箱中培养，时间不少于2d。每批培养基均应设置对照试验，以检验培养基本身是否被污染。

1.4 样品的采集和保存

1.4.1 样品的采集

水样应使用121℃经15min高压灭菌处理的玻璃瓶采集。同一水源且同一时间采集几类检测指标的水样时，应先采集供检测微生物指标的水样，且采样时应直接采集，不得用水样涮洗已灭菌的采样瓶，以避免手指和其他物品沾污瓶口[2]。

1.4.2 样品保存

采集的水样应立即送检，时间不得超过2小时。如无法及时送检，应将样品置于冰箱中，但不得超过24小时，否则会影响检测结果[3]。

1.5 培养基的制备

培养基是促使微生物生长繁殖、分离微生物纯种，以及鉴别微生物的营养物质。培养基的制备是微生物检测工作中最为重要的环节之一。培养基经过称量-调整pH值-加热煮沸-过滤-分装容器-灭菌-备用等一系列制备过程后，应能达到微生物生长所需的要求，如未能达到要求，微生物就不容易生长或不生长。由于培养基富含营养物质，易被污染或变质，故配好后不宜久置，最好现配现用。此外，培养基的质量、配制过程及保存方式都会直接影响检测结果的准确性。

2 水质微生物检测结果的质量控制

2.1 提高检验人员的素质水平

检验人员自身素质水平的高低会直接影响到微生物检验结果的准确性，因此可采取以下控制措施。

①检验人员要严格规范检验操作流程，在实验中对每个操作步骤、每个检测环境都做到严密监控。

②提高每位检验人员的素质和专业技能，经常针对检验人员进行专业知识和操作技能的培训，确保每位检验人员以高度的责任心做好每个检验环节，从而提高微生物检验的准确性。

③采集样品时要严格控制样品质量，因为样品质量的好坏将直接影响最终检验结果的准确性。因此，在进行检验样品的采集、处理、运送及储存时，一定要按照操作流程严格操作，这样才能够有效提高检验的质量。

2.2 做好培养基的质量控制

①每一批新购进的培养基一定要由专人仔细核对其名称、规格、数量、成分、外观特征、批号、保质期等是否符合要求，并做好记录[4]。

②每次配制好的培养基应填写好《培养基配置记录表》，且必须选取部分培养基放置于36±1℃培养箱内培养24小时，无杂菌生长即可待用。如发现破裂、水分侵入、色泽异常、有菌生长等，均应挑出弃用。

③已制备好的的培养基不宜保存过久，应存放于4℃冰箱内。同时，每批培养基应注明名称及配置日期。

2.3 加强检测环境及仪器设备的管理

微生物实验室应具备监测和控制环境条件的能力——组织人员对环境进行监控，并保存好相应的环境监控记录。同时，应保证工作环境满足检验检测工作的要求——当环境条件不利于检验检测工作的开展时，应停止检验检测活动，在进行有效处置后方可恢复。在水质微生物检测工作中，工作环境要满足相关检验检测标准或技术规范的要求，特别要对无菌室进行定期消毒，确保检验环境的无菌状态，从而保证检测结果准确可靠。

凡对检验检测结果的准确性有显著影响的仪器设备，在投入使用前必须经过法定计量机构的检定或校准。此外，使用中的仪器设备需按规定时间定期检定并进行日常维护，确保其功能正常并防止性能退化，进而保证检验检测结果的质量。

2.4 实验室间质量控制

为了保证检验检测结果的准确性，实验室除内部质量控制外，还需建立实验室间质量控制制度。开展实验室间比对能不断提高实验室的检测能力，监控实验室的持续能力，从而识别并缩小实验室之间检测结果的差异，提高各实验室间的微生物检验质量，进而获得可比性较高的准确检验结果。

参考文献：

[1] GB/T 16294-2010《医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》[S].

[2] GB 5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法水样的采集与保存》[S].

[3] GB 17378.7-2007《海洋监测规范》第7部分：近海污染生态调查和生物监测[S].

[4] 刘荣华.微生物检测中培养基的制备及注意事项[J].当代临床医刊，2015，28(1)：1236.