探讨快速检测方法在食品微生物检测中的应用

2020-03-04 22:53:59 来源：食品安全导刊

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　　探讨快速检测方法在食品微生物检测中的应用

　　
　　传统的人力食品安全检测已经被更科学的检测方法和精密的检测仪器所取代，为了避免因为检测漏洞导致食用者食用后出现中毒或者身体不适，食品微生物检测技术随着科技的发展不断优化。快速检测方法作为食品微生物检测中的一种新型检测方法，其对于食品微生物检测的作用还在探索过程中。本文以现阶段常用的检测技术为依据，分析快速检测方法在食品微生物检测中的应用和其优点。
　　
　　关键词：快速检测方法；食品微生物检测；应用
　　
　　中图分类号：TS207.4
　　
　　相较于传统自给自足的小农经济模式下的食品加工，现阶段食品在采购前都会经历生产、加工、运输这3个环节，被微生物污染的可能性大大增加。被微生物污染的食品会因为微生物的繁殖腐败，如果人们食用被微生物污染的食品，不仅因为食物中毒而产生呕吐、腹泻等症状，微生物污染程度严重还会危及人们的生命安全。现阶段环境污染对食品污染的影响加剧了人们对污染食品的恐惧，因此选取科学合理的食品安全检测方式是食品安全的基础保障。
　　
　　快速检测方法应用于食品微生物检测的意义
　　
　　经济发展带动了我国的食品需求，这种需求促进了我国食品行业的发展速度，繁多的食品加工种类加大了食品检测的难度。因为经济发展速度快使得我国现阶段的食品检测标准还有许多漏洞，美食多样化的发展和全球化的扩展速度加大了食品安全检测的压力，在食品的生产过程中和加工过程中，食品加工企业为了延长食品的保质期会加大化学添加剂的使用剂量，含有过多添加剂的食品被人们食用后有诸多危害，轻则引发食物中毒或者各种疾病，重则危及人们生命[1]。传统的显微镜检测不仅会产生检测漏洞使得被微生物污染的食物流向市场危害人们身体，而且显微镜检测的效率较慢，不仅检测结果的准确度低，而且检测人员的工作量较大。正是因为传统的显微镜检测技术的弊端太过明显，所以促进了快速检测技术在食品微生物检测中的应用。使用快速监测技术在提高被检测食品的安全性的前提下，减少了检测人员的工作量。
　　
　　在食品微生物检测中常用的快速检测技术
　　
　　免疫学技术
　　
　　酶联免疫吸附技术
　　
　　将已知抗原或抗体吸附在聚苯乙烯微量反应板或其他固相载体的表面，使酶标记过的抗原抗体在聚苯乙烯微量反应板或其他固相载体的表面进行充分反应，之后将液体中的游离成分进行洗涤清除，这就是快速检验法中常用的ELISA（酶联免疫吸附技术）技术的基本实验方法。在此项实验中常用的试验方法有双抗体夹心法和间接法，双抗体夹心法常用于检测大分子抗原，间接法闯勇于检测特异抗体。因为ELISA技术在现代微生物检测中的广泛应用，其灵敏性强、检测速度快的优点在应用中得以充分发挥[1]。
　　
　　免疫层析技术
　　
　　把检测样品放置到条状纤维膜上使其涌动，通过层析和免疫反应的双重作用使得检测样品在含有配体的纤维膜上显现，然后通过着色标记其中蕴含的微生物进行分析，这就是Immuno chromatography（免疫层析技术）技术的监测方式，作为免疫学技术的基础技术，Immuno chromatography技术在食品微生物检测过程中应用广泛[2]。检测员通过免疫层析技术可以测定被检测食物样本中的Listeria monocytogenes（李斯特菌），方法是在检测过程中使用扫描仪器对试纸条中的T线、C线等光密度值进行扫描，10min就可完成测定工作，测定限为：0.35×106-0.35×109CFU/ml。免疫层析技术的检验效率较高，所需时间少，在食品检验工作中应用较为广泛[3]。
　　
　　代谢学技术
　　
　　通过进行DNA的天然复制，进行体外DNA分子扩增的分子生物学技术称为PCR（单链构态多项性分析技术）技术，此项技术的主要作用是扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2ⁿ倍。作为代谢学中的基础技术之一，PCR技术是保证食品微生物检测结果科学合理的重要技术，因此被广泛应用于现代食品微生物检测试验当中[4]。作为一项在美国研发推广的技术PCR技术在我国的应用时间较晚，现在仍然处于优化阶段，其对食品中蕴含的细菌检测速度快、检测结果准确率高的特性加快了PCR技术应用于食品微生物检测的速度。
　　
　　分子生物学技术
　　
　　随着科学技术的发展，分子生物学技术也逐渐被应用于食品微生物检测中。分子生物学的基因芯片技术在食品微生物检测过程中的应用效果比较明显，其主要对特异性微生物的检测效果较好。在应用分子生物学技术检测食品微生物之前，检测人员首先要进行芯片点样中的寡核苷酸的提取，提取成功后进行DNA的扩列，其次对实际检测中的微生物进行荧光标记，最后以试验标准为依据进行数据融合。做完准备工作后在进行检测就会得出食品样本中的微生物检测结果，通过分析对比后就可知道食品合格与否，从根源上杜绝不合格食品流入市场威胁人们身体健康。
　　
　　传感器检测法
　　
　　基因传感器
　　
　　“将两种DNA分子相互组合，形成一个全新的DNA分子链，通过DNA分子链进行物理信号的传递与接收，然后通过换能器的形式展现”是基因传感器的基本原理。使用基因传感器进行食品微生物的检测不仅操作方法较为简单，而且检测时间也比传统显微镜的检验时间短，因此基因传感器在实际食品微生物检测过程中发挥了巨大的应用价值[5]。
　　
　　生物传感器
　　
　　“被测分子和敏感材料的特异性相结合，两者结合后发生的化学反应导致离子强度、离子颜色、离子信号发生变化，从而将其转化为电信号”是生物传感器的基本原理。使用生物传感器以间接的方式进行检测，利用生物传感器的灵敏度和特异性提高了食品微生物检测的准确性。
　　
　　以滤纸为载体的测试技术
　　
　　大肠菌群、大肠杆菌纸片荧光法是滤纸测试方法的技术重点，此项技术是由上海医科大学预防医学研究所研制的。大肠菌群检验方法有很强的选择性，不会出现假阳性的结果。纸片法的主要优点是：检出率高，体积较小，操作简便，培养时间短，占用空间少，特别适用于实验空间小的实验室及野外操作[6]。以滤纸为载体的测试技术的主要优点如下：首先，进行快速检测中检测食物微生物的检测过程中，一般情况下检测样本较少，在检测过程中避免了大量玻璃器皿的使用，小规模的检验降低了检测操作难度，少量的检测样本不仅便于运输、携带方便，而且减少了样本采购的费用，使得此项检验的环境需求低，可在野外场地、生产现场直接进行。其次，快速测试片可以在取样时同时接种，结果更能反映当时样本中真实的细菌数，避免了因为接种时间的不固定导致细菌繁殖的数量增多。最后，相较于对检测时间和检测场地有固定要求的床柜显微镜检测方法，快速测试法可以在基层环境和生产车间直接检验的模式降低了传统模式下企业送检的费用。
　　
　　快速检测方法应用于食品微生物检测的优点
　　
　　检测结果更科学
　　
　　应用快速检测方法检测食品微生物能够同时进行“接种”和“取样”这两项工作，这样的检测流程不仅避免了传统检测技术需要进行较长时间的细菌繁殖工作，而且因为检测工作的迅速性和检测工作的流畅性减少了传统检测方式因检测过程的原因产生的数据误差率，使得食品微生物检测的具体结果更加科学。科学的检测数据为食品安全提供了基础的数据保证。
　　
　　检测速度更迅速
　　
　　因为快速检测技术有先进的技术支持和精密的仪器支持，所以使用快速检测方法进行食品微生物检测的结果比传统显微镜检测的结果速度更快，在结束快速检测方法检测食品微生物后，检测产生的废渣和废液比传统检测技术少，不仅能够减轻大量的食品微生物监测后的废渣废液带来的环境污染[7]。而且较少的器皿清洗也减轻了食品微生物检测工作人员的日常工作量，进一步提高食品微生物的监测工作效率。
　　
　　结束语
　　
　　综上所述，现阶段很多快速检测方法都应用于食品微生物检测过程中，其中就有：代谢学技术、免疫学技术、分子生物学技术、传感器检测法等。这些检测技术均可以在较短的时间内完成食品微生物检测工作，而且准确度较高。因此在进行食品微生物检测时，检测人员要结合实际情况科学的选择检测方法，从而提高食品安全质量，为人们身体健康提供基础保障。
　　
　　侯乐启山东省枣庄市峄城区疾病预防控制中心