□ 马莉 杨帆 新疆维吾尔自治区水产科学研究所 农业部西北地区渔业资源环境科学观测实验站

摘　要：能力验证是判断和监控实验室能力的有效手段，参加农业部办公厅组织开展的“2018年水产品质检机构检测能力验证”工作，使用微波消解法进行样品消解，石墨炉原子吸收光谱法进行水产品中铅的检测，同步以标准样品作为质量控制手段。能力验证样品在发放96小时内完成检测并上报检测数据，获得了满意的结果，本文对能力验证样品检测以及铅在测定过程中的注意事项作简单小结。

关键词：能力验证 铅 检测

能力验证是利用实验室间比对，按照预先制定的准则评价参加者的能力[1]。其为判断和监控实验室能力的有效手段，是实验室通过外部措施补充其内部质量控制方法的技术，也是确保实验室质量管理体系持续改进的有效措施之一[2]。

铅元素广泛存在于自然界中，人类会通过食物链摄取铅，也会从被污染的空气中吸入铅。铅对神经系统的损害主要是能够引发末梢神经炎，使人出现运动和感觉障碍。当儿童血液中的铅含量超过60μg/100mL时，将会出现智能发育障碍和行为异常的症状，同时，铅对儿童的骨骼生长发育也会造成损害。无公害食品及绿色食品的认证过程中都将铅设为必检项目：GB 2762-2017《食品安全国家标准 食品中污染物限量》中和NY 5073-2006《无公害食品 水产品中有毒有害物质限量》中均规定，水产品中铅的限量指标为≤0.5mg/kg[3-4];NY/T 842-2012《绿色食品 鱼》中规定水产品中铅的限量指标为≤0.2mg/kg[5]。因此，提高对水产品中铅的检测准确度十分必要，参加能力验证也是反映检测数据是否准确的一种有效手段。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与设备

原子吸收分光光度计(赛默飞，CE 3500);微波消解仪(CEM，MARS 6);超纯水仪(Millipore，Q10);天平(赛多利斯，BS124S)。

1.2主要试剂

1000μg/mL铅标准溶液(中国计量科学研究院，GBW 08619-15073);硝酸(国药集团化学试剂有限公司，优级纯);过氧化氢(国药集团化学试剂有限公司，分析纯);磷酸二氢铵(国药集团化学试剂有限公司，优级纯)。

本次能力验证样品共2份，各10g左右，且均为肉糜状鲜样，分别装于棕色玻璃瓶中。两份样品中，一份为考核样本，另一份为干扰样本，能力验证工作要求发放样品96小时内报告测试结果。2份样品结果判定时，仅评价考核样本的检测结果，干扰样本不作判定。本单位样品编号分别为Pb48和Pb57。

1.3 方法

1.3.1 检测依据

采用国标方法GB 5009.12-2017《食品安全国家标准 食品中铅的测定》第一法，石墨炉原子吸收光谱法进行铅的检测。

1.3.2检测前的准备工作

所有实验中使用的玻璃器皿均经硝酸溶液(1+4)浸泡过夜，超纯水冲洗干净后晾干备用，注意要充分冲洗，以避免污染，从而降低样品空白值，提高检测时的稳定性。试验用水按照GB/T 6682-2008《分析实验室用水规格和试验方法》的规定使用一级水。

1.3.3 标准溶液的配制

准确吸取2.50mL浓度为1000μg/mL的铅标准溶液置于25.00mL容量瓶中，用1%硝酸溶液稀释至刻度并摇匀，此时溶液浓度为100.00μg/mL;再经多次稀释至浓度为20.00μg/L的铅标准溶液，备用。

1.3.4 样品前处理

准确称取肉糜样品1.000g，同时做3个平行样，放入聚四氟乙烯消解罐中，加8.00mL硝酸过夜(冷消解)。次日，加入2.00mL硝酸和1.00mL过氧化氢(30%)，装罐后放入微波消解仪中进行消解(消解程序见表1)。冷却后开盖于150℃的电热板上继续赶酸，至罐内液体剩余约0.25mL左右，用超纯水定容至10.00mL容量瓶中，混匀待测。同时做样品空白对照和标准样品消解。标准样品(缢蛏：国家海洋局第一海洋研究所，AK0248)称样量为0.150g，做7个平行样，消解赶酸后定容至25.00mL容量瓶中。

2 测定与结果

2.1 上机测定

主标液：20.00μg/L铅标准工作溶液;稀释剂：1%硝酸溶液;基体改进剂：20g/L磷酸二氢铵溶液;标准品及样品进样体积：20μL;基体改进剂进样体积：5μL。波长：283.3nm;通带：0.5nm;信号类型：峰高;背景较正：塞曼。标准工作曲线绘制为仪器自动稀释配制，石墨炉升温程序见表2。

干燥阶段分两步进行，选用80℃和100℃进行两步干燥。灰化和原子化阶段采用仪器自带的搜索最佳优化条件，选用700℃为灰化温度，1400℃为原子化温度。

2.2检测结果

依照上述方法条件，建立工作曲线方程Abs=0.01427C+0.0060，相关系数r=0.9996(见图1)。对样品进行测定，编号为Pb48的样品3平行结果为17μg/kg，相对标准偏差为6.9%;编号为Pb57的样品3平行结果为54μg/kg，相对标准偏差为3.9%，结果见表3;国家标准样品缢蛏(AK0248)6平行样品检测结果为1.36mg/kg，相对标准偏差为3.8%，检测结果在标准样品的标准值区间1.29±0.13mg/kg范围内，见表4。结果表明，该验证实验的精密度、准确度都能达到国家标准的要求，测定结果准确可靠。

图1 工作曲线

2.3 能力验证结果

本次能力验证中，重金属检测结果按Z比分数法统计，∣Z∣≤3判定为满意结果，∣Z∣>3判定为不满意结果，3≥∣Z∣>2需开展自查。

本单位样品编号为Pb57的样品检测结果54μg/kg的∣Z∣为1.75，判定结果为满意。编号为Pb48的样品为干扰样品，不做判定。

因此得出结论，本实验通过了农业部2018年水产品中铅的检测能力验证。

3 检测注意事项

能力验证样品与其他常规样品差异较大，原因为能力验证样品的某种成分可能含量较高，故检测的称样量和消解后定容体积往往具有不确定性，所以推荐在正式测定前进行预实验。在样品量足够的情况下，可先做3个平行样，上机确定样品大概浓度范围后再进行正式检测，避免一次性将样品用完，由于称样量以及定容体积不合适，造成检测结果有偏差。

铅广泛存在于环境中，检测时极易受到污染，因此整个实验过程中一定要防止污染，例如化妆品中也可能含有铅，这就要避免其他人员接触对样品检测造成污染。同时，所用到的试剂溶液可上机测试铅含量，若发现样品空白值较高(一般来说，铅的空白测定吸光度在0.02以下)则应考虑实验用水和试剂是否受到污染。用水最好为实验室一级水，所用试剂除要考虑试剂级别外，不同生产厂家的试剂也具有一定差异，同一厂家不同批次的药品试剂可能也会存在差异。

检测样品若发现重现性、平行性不好等情况，在排除样品处理过程受污染的前提下，可考虑是否是进样问题，此时可检查进样针注入位置是否合适;进样结束，针头是否有溶液挂壁现象，如有挂壁，则表明实际进样体积不准，这关系到样品检测结果准确性，因此在检测过程中，要经常注意进样情况。

如测定标准样品的结果与实际值不符，则应考虑浸泡容器的酸液是否受到污染。最简单的检查方式，即取一只烧杯，加入少许硝酸放在电热板上加热至近干，用水冲洗烧杯壁合并洗液定容后上机测定，若此溶液铅含量高，则推断浸泡容器的酸液被污染。

检测过程所用的标准样品，最好通过改变称样量和定容体积的方法，将溶液测定浓度调节至与能力验证样品浓度相近，这样更能反映样品检测结果的准确性。实验中，可考虑购买不同浓度的标准样品，从中选取一种与能力验证样品浓度接近的标准样品进行同步检测。

检测时，通过改变样品称样量以及定容体积的方式，尽量使样品的检测浓度位于标准曲线中段，此时样品结果较为可靠。如样品检测浓度靠近标准曲线下端，接近检出限准确度不高;如样品浓度靠近标准曲线上端，吸光度过高时，样品检测浓度可能偏低。

设定石墨炉程序时，由于消解后的样品具有一定的酸度且加入了基体改进剂，为避免样品在干燥阶段发生液体暴沸飞溅，可选取进样溶液沸点附近温度，将干燥温度分别设为两步，采取缓慢阶段升温和延长保温时间的方式保证检测结果的准确性。灰化温度和原子化温度最好进行优化条件搜索，选取在保证吸光度稳定且仪器响应信号值高的温度，在响应值接近的温度区间选取较低的温度，因为灰化温度和原子化温度会直接影响石墨管的使用寿命。

4 小结

本次能力验证采用国标方法GB 5009.12-2017《食品安全国家标准 食品中铅的测定》进行测定，采用方法包括石墨炉原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法、火焰原子吸收光谱法和二硫腙比色法4种检测方法[6]。本单位采用石墨炉原子吸收光谱法进行水产品中铅的检测，用标准样品同步实验作为实验室内部质量控制手段，在能力验证举办方发放样品的96小时内按时提交了检测结果并获得满意评定结果。这表明，用此方法进行铅的检测，数据可靠有效。

通过参加能力验证活动，有利于实验室实现自我评定，是实验室检测质量的反映。参加能力验证获得通过，是增强用户对实验室检测能力信任度的一个有力证明，同时增强了实验室对所出具数据的自信心。

参考文献：

[1] CNAS-RL02: 2018 能力验证规则[S].

[2]李锦程，陶坪，王冬妍，赵检，李乃洁，史铁嘉，张凯.对实验室能力验证的认识[J].现代测量与实验室管理，2006(06):35-37.

[3] GB 2762-2017 食品安全国家标准 食品中污染物限量[S].

[4] NY 5073-2006 无公害食品 水产品中有毒有害物质限量[S].

[5] NY/T 842-2012 绿色食品 鱼[S].

[6] GB 5009.12-2017 食品安全国家标准 食品中铅的测定[S].