LC-MS/MS测定蜜饯中酸性嫩黄G的方法研究

2018-10-26 15:56:48 来源：食品安全导刊

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　　《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》规定了蜜饯类食品中允许使用的着色剂，包括靛蓝及其铝色淀、萝卜红、栀子黄、红花黄、柠檬黄及其铝色淀、日落黄及其铝色淀、天然苋菜红等。通常而言，在国家标准内蜜饯产品是可以添加食用色素的，对于身体也不会产生太大的危害，但是按标准使用量添加染色剂的水果蜜饯色泽不会太过鲜艳，不良企业为了色泽鲜艳和逃避检查有可能使用非食品用染色剂酸性嫩黄G，这样不但能使产品色泽鲜艳，而且在检验时由于没有这几项的检测而检验合格。酸性嫩黄G对人体危险性巨大，并且没有适用的检测方法。

　　材料与方法

　　试验材料：市售蜜饯。

　　仪器与试剂

　　Sartorius ME215S十万分之一天平；Sartorius CP224S万分之一天平；AB QTRAP 4500超高效液相色谱-串联质谱联用仪(美国Sciex公司产品，配有Agilent 1290超高效液相色谱仪及电喷雾离子源)；Milli-Q超纯水器；IKMS3漩涡混合器；KQ-800DE型数控超声波清洗器；高速冷冻离心机。

　　标准物质：酸性嫩黄G（Dr Ehrenstorfer GmbH公司产品，纯度：95.7%）；乙腈、甲醇和冰乙酸为色谱纯，丙酮、氯化钠、PSA和硫酸镁以及实验所用其他试剂为分析纯。

　　固相萃取小柱：waters公司WAX、MCX、HLB

　　方法

　　样品处理。取本品2g粉碎，80℃水8mL，混匀，超声10分钟，离心取上清液，残渣加1%氨水乙醇超声10分钟，离心，合并上清液，调pH值至6上wax柱（平衡：5 mL甲醇和5 mL超纯水）弃去滤液，用3mL超纯水和3 mL甲醇溶液清洗OASIS WAX小柱（正交曲线确定淋洗体积主要考虑在不洗脱目标物质的情况下尽可能地洗脱掉杂质）。用5 mL 5%氨化甲醇溶剂洗脱SPE小柱（正交曲线确定洗脱体积），收集洗脱液，在50˚C水浴下，氮气吹干后，用1 mL5%的甲醇水溶液复溶，过0.22μm PTFE滤膜上机。

　　色谱条件。ZORBAX SB-C18 2.1×100mm 1.8μm色谱柱；流动相A为甲醇，水(10mmol/L乙酸铵,流速：0.2ml/min，柱温：40℃，进样体积：5μL，梯度洗脱见表1。

　　表1色谱梯度洗脱条件

　　质谱条件。离子源：电喷雾离子源（ESI-）；扫描方式：负离子扫描；检测方式：MRM模式；电喷雾电压：-4500V；干燥气：N2；雾化气50 units；雾化器蒸发温度：550℃；质谱分析参数见表2。

表2 MRM监测离子对及碰撞能量等参数设定表

　　结果与分析

　　不同样品前处理

　　试验中比较了WAX、HLB、MCX固相萃取柱萃取净化方法具体结果见表3

　　(HLB固相萃取柱上样为样品液1ml加水5ml混匀后上样)

　　表3

　　线性范围和检出限

　　配制浓度为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、100μg/L的标准溶液进行上机检测，混合标准溶液MRM色谱图见图1。以峰面积与标准溶液浓度做线性回归方程为y=280021x-5133，相关系数R2为0.9999。在空白蜜饯样品中添加酸性嫩黄G，提取净化后进行测定，以信噪比（S/N）为确定方法的检出限，酸性嫩黄G的检出限为2.0μg/kg。