AES-GPC-GC法同时测定贝类中47种有机氯及指示性多氯联苯

2017-06-23 15:08:53 来源：食品安全导刊

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　　目的：建立快速溶剂萃取-全自动凝胶渗透色谱净化-电子俘获气相色谱法(ASE-GPC-GC)同时测定贝类中20种多氯联苯(PCBs)、27种有机氯农药(OCPs)的分析方法。方法：样品冻干后用快速溶萃取，经全自动凝胶渗透色谱系统净化后，用两条串联毛细管色谱柱分离，电子俘获检测器进行检测。结果：本方法采用保留时间定性，外标法定量，同时分析47种化合物时，组分分离良好，线性范围除氯菊酯、胺菊酯外在5～400μg/L浓度范围内，相关系数＞0.997，方法的加标回收率在75％～125％之间，相对标准偏差小于10％，检出限在0.2～0.5μg/kg之间，基本上能满足贝类样品分析的要求。

　　多氯联苯(Polychlorinated biphenyls，PCBs)和有机氯农药(Organochlofine pesticides，OCPs)是环境中难以降解的主要持久性有机污染物，具有脂溶性、持久性、疏水性等特点，极少量的残留即可对生物体产生很强的致畸、致突变以及内分泌干扰作用。由于其易在鱼、虾、贝等海产品中富集，对水产品安全及人类健康产生很大危害，近年来，大量学者正在积极开展近海区域环境及生物的有机污染调查工作。食品中测定多氯联苯、有机氯农药的国标方法各自独立，前处理也各不相同且有的操作繁琐、技术相对落后，目前尚没有针对食品中PCBs和OCPs多组分同时分析的国标方法，随着调查研究工作的深入开展，开发海产品品中多组分的快速同时测定技术具有重要意义。

　　试验部分

　　仪器与试剂7890B气相色谱仪(美国Agilent公司)，ECD检测器；APLE-2000型加速溶剂萃取仪(北京吉天公司)；全自动凝胶渗透色谱系统(美国J2 scientific公司)，配自动进样器、凝胶净化模块和固相萃取模块；氮吹仪(美国Orgnomation公司)；旋转蒸发仪（美国SCILOGEX公司）；冻干机（美国hbconco公司），脱活石英毛细管柱连接器(美国Agilent公司)。正已烷、丙酮、二氯甲烷(农残级，美国Merck公司)；20种PCBs混合标准品：PCB28、PCB52、PCB101、PCBll8、PCBl38、PCBl53、PCBl80、PCBl98（中国农业部环境保护科研检测所）PCBl8、PCB33、PCB44、PCB70、PCBl05、PCBl28、PCBl70、PCBl87、PCBl94、PCBl95、PCB199、PCB206（ACC）27种OCPs标准品：α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、p,p'-DDT、o,p'-DDT、p,p'-DDE、p,p'-DDD、六氯苯、七氯、环氧七氯、氯丹、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、灭蚁灵、五氯硝基苯、硫丹、除螨酯、丙烯菊酯、杀螨酯、胺菊酯、甲氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯（中国农业部环境保护科研检测所）。使用时，所有标准品均用正己烷稀释。

　　样品前处理贝类中脂肪含量比较低，大约2%左右，准确称取贻贝或牡蛎样品10g，经组织粉碎机匀浆，冻干后研磨成粉末状装入萃取池，以二氯甲烷+正己烷混合液(1:l V/V)为萃取剂，进行加速溶剂萃取。将萃取液用氮吹仪浓缩后进全自动凝胶渗透色谱系统净化，所得溶液再经弗罗里硅土小柱净化后，氮吹浓缩后用正己烷定容进GC-ECD检测。

　　仪器分析条件

　　（1）加速溶剂萃取仪提取试剂为二氯甲烷+正己烷(1:l V/V)，系统压力10Mpa，加热温度100℃，加热时间300s，萃取时间180s，清洗体积为萃取池体积的40％，氮气吹扫时间100s，循环2次。

　　（2）全自动凝胶渗透色谱系统流动相为环己烷+乙酸乙酯(1:l V/V)，流速5mL/min，GPC柱为Bio Beads S-X3填料的快速高效柱（300×20mm，200—400目多孔交联聚苯乙烯聚合物），内置式紫外检测器，254nm固定波长。

　　（3）色谱条件进样口温度280℃，ECD检测器温度320℃，不分流进样。尾吹为氮气，流速57.6mL/min，载气为氦气，流速2.4mL/min。色谱柱类型：DB-1(30m×0.32mm×0.25μm)与HP-5(30m×0.32mm×0.25μm)通过脱活毛细管柱连接器串联。色谱柱升温程序：80℃保持Omin，以80℃/min升至150℃，保持3min,以30℃/min升至185℃，保持16min，以70℃/min升至195℃，保持15min，以80℃/min升至220℃，保持12min，以20℃/min升至250℃，保持8min，以80℃/min升至280℃，保持8min，以80℃/min升至300℃，保持0.5min。

　　结果与讨论

　　标准物质的气相色谱图见图1

　　定性定量分析根据标准色谱图中各组分的保留时间，对贝类样品中的各组分进行定性分析。采用标准系列峰面积计算法进行定量分析。

　　方法的线性范围和检出限配制多氯联苯和有机氯农药混合标准工作溶液,氯菊酯和胺菊酯灵敏度较低，配制浓度范围为20～400μg/L，其他标准配制浓度范围为5～400μg/L，在此范围内，多氯联苯和有机氯农药均呈良好的线性相关，相关系数＞0.997。通过在样品中添加混合标准溶液进行测定来确定方法的检出限，根据3倍信噪比测得多氯联苯和有机氯农药的检出限在0.2～0.5μg/kg之间，满足试验要求。

　　方法的精密度及准确度将贝类样品平均分为三份，第一份不添加任何成分，第二份添加低浓度区域标准物质，第三份添加中等浓度区域标准物质，然后按上述方法方法进行测定，根据所测得的量与加入的量进行比较，扣除样品本底值算出回收率，结果显示本方法的加标回收率在加标回收率在75％～125％之间，RSD＜10％，该方法准确度和精密度良好，能满足贝类样品分析的要求。

　　本次试验以加速溶剂萃取法提取贝类中的47种PCBs和OCPs，全自动凝胶渗透色谱系统净化后以串联毛细管色谱柱GC-ECD测定，方法快速、准确、污染小，基本上能满足国家限量标准的要求。

　　王克陈霞李沧区疾病预防控制中心