粮油谷物饲料中霉菌毒素荧光定量快速检测系统
—10分钟准确定量测定
粮油谷物饲料中霉菌毒素的污染情况
目前,已知能产生霉菌毒素的真菌有150余种,产生的霉菌毒素约有300种,其中包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮及其衍生物类毒素、呕吐毒素、伏马菌素、T2毒素等。真菌的生长和繁殖都需要一定的温、湿度条件,最适宜生长温度一般为20~30℃,霉菌繁殖产毒的最适温度为25~30℃。其中曲霉菌属最适宜生长温度为30℃左右,青霉菌属为25℃左右,镰刀菌属一般为25℃左右。当真菌处于干燥、低温或与其他真菌竞争的应激情况时,就会产生霉菌毒素。由于真菌生长有一定的地域性,因此,不同区域占优势的霉菌毒素种类也有所不同。例如,在亚热带和热带地区,农产品和饲料主要被黄曲霉素和某些赭曲毒素污染;而玉米赤霉烯酮、呕吐霉素、赭曲霉毒素A、T-2毒素、烟曲霉毒素则在温带地区占有显著优势。
据我国粮油谷物饲料霉变情况调查报告,南方地区的真菌检出率和含量都大大高于北方地区,特别是5~9月份,南方地区的平均气温都处于20℃以上,平均相对湿度在80%以上,在这种高温高湿的环境条件下,真菌生长繁殖最为旺盛,谷物饲料霉变大多发生在这个季节;北方的夏季虽然温度较高,但相对湿度较低,不易霉变,多数因加工、运输或贮存不当而产生霉菌毒素。
目前,霉菌毒素的检测方法主要分为两大类,即确认方法和快速方法。确认方法主要基于理化仪器设备,如薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高压液相色谱法(HPLC)和各种联用技术如气质联用(GC-MS)、液质联用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化学基础上的免疫分析方法如免疫亲合柱-荧光检测(IAC-FLD)、酶联免疫吸附法(ELlSA)和胶体金免疫层析法等。
结果准确、法定认可是理化方法最大的优点,但是理化方法的仪器设备价格昂贵,前处理过程复杂、操作繁琐、效率低,成本极高,因此不适用于大规模样本的筛查和日常的内控检测,一般仅用于最终的确证。酶联免疫吸附法ELISA 方法和胶体金快速检测卡是企业常用的快速检测方法,但也均存在各自的优缺点:ELISA 方法灵敏度相对较高,且能定量检测,但操作过程相对复杂,对环境和人员要求高,环境干扰因素复杂,重复性较差;胶体金检测卡可以满足现场快速的要求,能在5~10min内快速测定,但是只能定性,且灵敏度较低,肉眼观察主观性较强,重复性差。
霉菌毒素限量标准
粮油谷物饲料中霉菌毒素荧光定量快速检测系统
上海飞测生物基于全球领先的荧光定量FPOCT技术平台,开发了霉菌毒素荧光定量快速检测系统,该系统结合了胶体金快速、酶联免疫定量以及色谱法准确的特点,可在10min内快速准确定量的测定出粮油谷物饲料中的霉菌毒素,包括黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素A、伏马菌素、T2毒素等含量,样品前处理简单(仅需8min),六种毒素一次提取即可,操作简便,只需一步加样,无需标准品,无需做标准曲线,采用荧光免疫定量分析仪读数,结果准确可靠且可现场打印,准确性高度符合HPLC法的检测结果,为霉菌毒素的快速检测和控制提供了一种全新的技术手段,适用于各类原料收储、粮油加工企业、饲料加工企业、第三方检测机构及政府相关监管部门。
检测操作过程
(1) 样品粉碎(1min);
(2) 过20目筛;
(3) 乘量样品(1g±0.02);
(4) 加提取液5mL;
(5) 震荡提取(5min);
(6) 4000转离心(1min);
(7) 取上清液稀释;
(8) 点样检测100uL;
(9) 恒温孵育10min;
(10) 读数和打印。
飞测生物霉菌毒素荧光定量快速检测系统优势
(1)10min快速定量:集胶体金快速检测、酶联免疫定量检测、色谱质谱准确检测的特点于一身,实现10min内霉菌毒素的快速准确定量检测,检测结果可现场打印。
(2)内置定量标准曲线:仪器内置标准曲线,无需检测时再做标准曲线,既节省了成本,也避免了操作人员与霉菌毒素的接触,保护操作人员的安全。
(3)随到随检:对检测样本量无要求,既可单个或少量样本随到随检,也可大量样本同时检测,并可实现现场检测。
(4)操作简便:一次提取即可检测所有种类的霉菌毒素,也无需对检测样本进行任何pH的调节。
(5)配置要求低:对配套的仪器设备及人员要求低,操作人员仅需短期培训就能熟练掌握。
(6)远程网络支持:仪器可通过网络自动进行标准曲线读取、软件升级、问题故障诊断、质量控制等。
(7)性价比高:花胶体金试纸条的价格,获得色谱检测的结果,并且节省人力物力,大幅降低检测费用。
□ 上海飞测生物科技有限公司 供稿
霉菌毒素是产毒真菌在适宜环境条件下产生的有毒代谢产物。根据联合国粮农组织资料显示,世界上约有25%的谷物因不同程度地受到霉菌毒素的污染而不能食用,这不仅在经济上造成了巨大的损失,而且由真菌产生的霉菌毒素还能引起人畜中毒,严重时甚至可以致癌。粮油谷物饲料中霉菌毒素的污染情况
目前,已知能产生霉菌毒素的真菌有150余种,产生的霉菌毒素约有300种,其中包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮及其衍生物类毒素、呕吐毒素、伏马菌素、T2毒素等。真菌的生长和繁殖都需要一定的温、湿度条件,最适宜生长温度一般为20~30℃,霉菌繁殖产毒的最适温度为25~30℃。其中曲霉菌属最适宜生长温度为30℃左右,青霉菌属为25℃左右,镰刀菌属一般为25℃左右。当真菌处于干燥、低温或与其他真菌竞争的应激情况时,就会产生霉菌毒素。由于真菌生长有一定的地域性,因此,不同区域占优势的霉菌毒素种类也有所不同。例如,在亚热带和热带地区,农产品和饲料主要被黄曲霉素和某些赭曲毒素污染;而玉米赤霉烯酮、呕吐霉素、赭曲霉毒素A、T-2毒素、烟曲霉毒素则在温带地区占有显著优势。
据我国粮油谷物饲料霉变情况调查报告,南方地区的真菌检出率和含量都大大高于北方地区,特别是5~9月份,南方地区的平均气温都处于20℃以上,平均相对湿度在80%以上,在这种高温高湿的环境条件下,真菌生长繁殖最为旺盛,谷物饲料霉变大多发生在这个季节;北方的夏季虽然温度较高,但相对湿度较低,不易霉变,多数因加工、运输或贮存不当而产生霉菌毒素。
目前,霉菌毒素的检测方法主要分为两大类,即确认方法和快速方法。确认方法主要基于理化仪器设备,如薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高压液相色谱法(HPLC)和各种联用技术如气质联用(GC-MS)、液质联用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化学基础上的免疫分析方法如免疫亲合柱-荧光检测(IAC-FLD)、酶联免疫吸附法(ELlSA)和胶体金免疫层析法等。
结果准确、法定认可是理化方法最大的优点,但是理化方法的仪器设备价格昂贵,前处理过程复杂、操作繁琐、效率低,成本极高,因此不适用于大规模样本的筛查和日常的内控检测,一般仅用于最终的确证。酶联免疫吸附法ELISA 方法和胶体金快速检测卡是企业常用的快速检测方法,但也均存在各自的优缺点:ELISA 方法灵敏度相对较高,且能定量检测,但操作过程相对复杂,对环境和人员要求高,环境干扰因素复杂,重复性较差;胶体金检测卡可以满足现场快速的要求,能在5~10min内快速测定,但是只能定性,且灵敏度较低,肉眼观察主观性较强,重复性差。
霉菌毒素限量标准
上海飞测生物基于全球领先的荧光定量FPOCT技术平台,开发了霉菌毒素荧光定量快速检测系统,该系统结合了胶体金快速、酶联免疫定量以及色谱法准确的特点,可在10min内快速准确定量的测定出粮油谷物饲料中的霉菌毒素,包括黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素A、伏马菌素、T2毒素等含量,样品前处理简单(仅需8min),六种毒素一次提取即可,操作简便,只需一步加样,无需标准品,无需做标准曲线,采用荧光免疫定量分析仪读数,结果准确可靠且可现场打印,准确性高度符合HPLC法的检测结果,为霉菌毒素的快速检测和控制提供了一种全新的技术手段,适用于各类原料收储、粮油加工企业、饲料加工企业、第三方检测机构及政府相关监管部门。
检测操作过程
(1) 样品粉碎(1min);
(2) 过20目筛;
(3) 乘量样品(1g±0.02);
(4) 加提取液5mL;
(5) 震荡提取(5min);
(6) 4000转离心(1min);
(7) 取上清液稀释;
(8) 点样检测100uL;
(9) 恒温孵育10min;
(10) 读数和打印。
飞测生物霉菌毒素荧光定量快速检测系统优势
(1)10min快速定量:集胶体金快速检测、酶联免疫定量检测、色谱质谱准确检测的特点于一身,实现10min内霉菌毒素的快速准确定量检测,检测结果可现场打印。
(2)内置定量标准曲线:仪器内置标准曲线,无需检测时再做标准曲线,既节省了成本,也避免了操作人员与霉菌毒素的接触,保护操作人员的安全。
(3)随到随检:对检测样本量无要求,既可单个或少量样本随到随检,也可大量样本同时检测,并可实现现场检测。
(4)操作简便:一次提取即可检测所有种类的霉菌毒素,也无需对检测样本进行任何pH的调节。
(5)配置要求低:对配套的仪器设备及人员要求低,操作人员仅需短期培训就能熟练掌握。
(6)远程网络支持:仪器可通过网络自动进行标准曲线读取、软件升级、问题故障诊断、质量控制等。
(7)性价比高:花胶体金试纸条的价格,获得色谱检测的结果,并且节省人力物力,大幅降低检测费用。
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