《食品安全导刊》刊号:CN11-5478/R 国际:ISSN1674-0270

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显齿蛇葡萄叶有效成分的提取工艺研究

2016-09-26 15:55:23 来源: 食品安全导刊

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  显齿蛇葡萄为葡萄科蛇葡萄属的一种野生木质落叶藤本植物,又名白茶、藤茶、龙须茶、甘露茶等。2013年12月24日国家卫生计生委发布了《关于批准显齿蛇葡萄叶等3种新食品原料的公告》,确定了显齿蛇葡萄叶可以作为新资源食品来使用。显齿蛇葡萄叶中黄酮化合物含量高达43.4~45.5%,富含二氢杨梅素、槲皮素、显齿蛇葡萄素、山奈酚等成分。由于人体不能直接合成黄酮化合物,只能从食品中间接获得,因此研究植物中黄酮化合物的提取方法有重大意义。本试验采取超声波提取法,对显齿蛇葡萄黄酮化合物的提取工艺条件进行筛选,以期获得显齿蛇葡萄黄酮化合物超声提取的优化工艺条件,为显齿蛇葡萄食用及药用资源的合理开发提供一定的依据。

  实验材料,显齿蛇葡萄叶干品(产地为湖南省)、芦丁标准品、无水乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠等,以上试剂均为分析纯,原料及试剂均由吉林益健生物科技有限公司提供。KQ250DB型数控超声波清洗器、QUINTIX124-1CN型分析天平、HH-6型恒温水浴锅、TDZ5-WS低速台式离心机、UV-1750型紫外可见分光光度计。

  试验方法,选取显齿蛇葡萄干品,粉碎过60目筛,准确称取5.00g干粉置于圆底烧瓶中,以乙醇溶液作为提取溶剂,分别考查液料比、提取剂浓度、超声温度、超声时间、超声功率对黄酮化合物提取效果的影响。具体条件设为:液料比设为10:1、20:1、30:1、40:1、50:1、60:1(mL/g),乙醇浓度设为25%、35%、45%、55%、65%、75%、100%,超声温度设为25℃、35℃、45℃、55℃、65℃、80℃,超声时间设为10、25、40、55、70、85min,超声功率设为120、150、180、210、240、270W。经过超声波提取后,过滤、离心、稀释,利用硝酸铝-亚硝酸钠显色法测定溶液吸光度,计算显齿蛇葡萄中黄酮化合物的得率。以上不同条件实验均平行3次,结果取平均值。

  实验结果分析,液料比的影响:提取剂的体积直接关系到物料有效成分的浸出量,当液料比小于30:1时,得率明显上升,液料比为30:1时,得率达到12.7%,当液料比大于30:1时,其得率上升趋势变缓。从节约能耗的角度出发,液料比确定为30:1最佳。提取剂浓度的影响:当提取剂乙醇的浓度变化时,极性也随之变化,对提取效果有一定影响。乙醇浓度在65%左右时得率最大,可达到13.05%,当乙醇浓度升高至75%或100%时,得率反而降低。可能是由于乙醇浓度过高使非极性物质也随之溶出,导致黄酮化合物得率下降。因此确定乙醇浓度为65%时较佳。超声温度的影响:当温度小于65℃时,随着温度的升高得率有所增加,当温度超过65℃时,得率逐渐下降,同时提取物的颜色逐渐变深。可能是由于温度过高使部分黄酮化合物结构被破坏,同时叶绿素溶出使颜色变深,因此确定超声温度为65℃为宜。

  超声时间的影响:当超声时间在40min左右时得率最大为13.93%,延长超声时间,得率反而降低。可能是由于超声时间过短黄酮化合物溶解不充分,超声时间过长,溶解出来的化合物易被氧化。综合时间、能耗等因素,确定超声时间为40min为宜.超声功率的影响:当超声功率小于240W时,得率随着功率的增加也逐渐提高,超声功率大于240W后,得率反而下降,可能是由于超声功率太高对分子造成一定程度的破坏。因此确定超声功率应控制在240W以内。

  从显齿蛇葡萄中提取黄酮化合物的常用方法主要有五种:热浸提法、微波提取法、超声波提取法、超临界萃取法、逆流提取法。超声波提取法是通过超声振荡产生空化效应、扰动效应,对提取物进行搅拌和破碎,加速有效成分的扩散释放,具有易操作、省时、提取率高、结构破坏性小的优点,该方法被广泛用于食品原料中有效成分的提取。本实验得到的超声法提取显齿蛇葡萄黄酮化合物的最佳条件为:液料比为30:1;提取剂乙醇的浓度为65%;超声温度为65℃,超声时间40min;超声功率240W。用以上工艺条件进行超声提取,得率可达15,11%。以上数据可为显齿蛇葡萄黄酮化合物相关产品的开发提供参考。

  长春医学高等专科学校 汲军 王丹丹

  吉林省中医中药研究院 赵昱伟

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