氯霉素是一种高效广谱的抗生素，可用于各种动物传染性疾病的防治，但它的副作用很大。1999年9月13日中华人民共和国农业部发布了《动物性食品中兽药最高残留限量》的通知，规定了氯霉素在所有食品动物的可食用组织中不得检出。2002年3月15日，被我国农业部关于发布《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》列为禁止使用的抗生素。

　　研究使用智能化食品安全一体机对样品进行前处理后，使用高效液相色谱仪进行检测。实验方法简单易行，目标物质回收率高。

　　试剂和材料

　　氯霉素标准品来自中国水产科学研究院。准确称量氯霉素标品10mg，用甲醇定容于100mL容量瓶中，配制成100 μg/mL的标准贮备液。

　　氯霉素前处理试剂盒，包含提取剂、固相萃取柱、洗脱剂。

　　其余试剂均为色谱纯。

　　仪器和设备

　　高效液相色谱仪DIONEX U3000：配有DAD检测器。

　　智能化食品安全一体机。

　　液相色谱条件

　　(1)色谱柱：C18柱，4.6 mm×150mm(d.i.),粒度5μm。流动相：乙腈+1%乙酸水溶液=20+80(V/V)。流速：1.0mL/min柱温：35℃。进样量 ：20μL。检测波长：282nm。

　　测定步骤

　　称取样品1.00g，加入到智能化食品安全一体机的样品杯中，装入固相萃取柱，按表1设定仪器工作参数。

　　处理完成后，取下固相萃取柱，加入1mL洗脱剂洗脱，过4.5μm膜后按色谱条件检测。

　　结果与讨论

　　色谱测定

　　在上述色谱条件下，氯霉素的保留时间约为11.137min。图1、图2为样品加标前后色谱图对照。

　　绘制标准工作曲线

　　移取氯霉素的标准溶液，用流动相稀释成50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L标准工作溶液，用高效液相色谱仪测定，和空白样液色谱对照得出标准工作曲线。线性系数0.989，y=1073.9x+5829.1。

　　样品检测结果计算

　　用色谱数据处理机或按式(1)计算供试样品中氯霉素残留量。

　　ω=ci;

　　ω-食品中氯霉素残留量，μg/kg;

　　ci-标准曲线上查出试样溶液中氯霉素标准工作溶液的浓度，μg/L。

　　统计10个以上样品检测数据，得出方法回收率为97.67%左右。