安捷伦ZORBAX超高压快速高分离度(RRHD)宽孔径300A色谱柱是进行蛋白质一级结构分析的最佳选择,能够有效进行蛋白质鉴定、翻译后修饰定量,在生物治疗用蛋白的研发及生产应用中还有助于获得杂质的指纹图谱。
现在,安捷伦又增加了多种新的ZORBAX色谱柱固定相,为广大用户提供更多的选择来优化整体结果。与安捷伦3.5μm和5μm300A色谱柱一样,新型C18、C8和C3色谱柱也使用StableBond固定相。此外,新型ZORBAX宽孔径300A二苯基固定相色谱柱使用安捷伦Pursuit XRs100A和200A色谱柱采用的二苯基固定相。
C18固定相采用反相填料,用于肽片段分析中的重要应用,例如从蛋白质酶解物到小分子蛋白质分析。C8固定相分析大分子蛋白质(包括抗体)时具有较高的分离度和回收率。C3固定相能够为较大分子疏水性蛋白质(包括单克隆抗体MAb)分离提供更多选择性和更好的峰形,回收率也更高。而二苯基固定相通过与MAb和芳香族氨基酸的pi-pi相互作用为您带来更多选择性。
下图显示了安捷伦ZORBAX RRHD生物色谱柱系列的部分应用。图1~4显示了4种色谱柱在不到2分钟的时间里极好地分离了蛋白质和降解产物。C18和二苯基固定相的色谱图包含了色谱柱的选择性,图5对两者的性能进行了比较。与C18柱相比,二苯基柱的分离度更好。表1还列出了C18柱和二苯基柱的一些性能参数。
表1 两种安捷伦ZORBAX 300生物色谱柱的性能特性
蛋白质 二苯基柱保留时间(分钟) C18柱保留
时间(分钟) 二苯基柱塔板数 C18柱塔板数
核糖核酸酶A 1.35 1.41 50816 39977
细胞色素C 1.56 1.66 63533 60757
溶菌酶 1.85 1.90 92272 83890
最大程度优化分析结果
将目光移向ZORBAX生物色谱柱系列,客户便可轻松找到最适合特定应用的色谱柱。该系列色谱柱采用久经验证的StableBond技术,该技术在低pH环境下具有良好的稳定性,使用三氟乙酸或甲酸流动相改性剂分离蛋白质和多肽时也能得到对称峰形,丝毫无损色谱柱寿命。在紫外和质谱检测下都能获得稳定的基线。这些新型色谱柱的柱效得到极大的提高,进一步改善了分离度,并且能够更可靠地定量翻译后修饰。
色谱柱的包装工艺也经过优化,用于安捷伦1290Infinity液相色谱时最高耐压1200bar。安捷伦ZORBAX RRHD 300A1.8μm色谱柱有50mm和100mm两种长度规格用于快速分离和高分离度分析,对于大多数复杂样品都能实现真正的高分离度分离。这些色谱柱在分析蛋白质时具有UHPLC性能的所有优势,不仅能提高效率,还能使客户对所有结果都信心百倍。下面是关于如何选择适合的安捷伦ZORBAX色谱柱来重现良好的蛋白质分离并提高所有分析结果准确度的介绍。
色谱条件分析
1.安捷伦ZORBAX RRHD 300SB-C3色谱柱色谱条件
样品:核糖核酸酶A、细胞色素C和溶菌酶(3mg/mL);
进样量:1μL;
流动相A:A含0.1%TFA的蒸馏水溶液,B含0.01%TFA的乙腈溶液;
梯度:0~2.5minB从10%增加到70%;
流速:1mL/min (~700bar);
HPLC仪器:1290Infinity系列;
检测:紫外,280nm。
2.安捷伦ZORBAX RRHD 300SB-C8色谱柱色谱条件
样品:核糖核酸酶A、细胞色素C和溶菌酶(3mg/mL);
进样量:1μL;
流动相A:A含0.1%TFA的蒸馏水溶液,B含0.01%TFA的乙腈溶液;
梯度:0~2.5minB从10%增加到70%;
流速:1mL/min (~700bar);
HPLC仪器:1290Infinity系列;
检测:紫外,280nm。
3.安捷伦ZORBAX RRHD 300SB-C18色谱柱色谱条件
样品:核糖核酸酶A、细胞色素C和溶菌酶(3mg/mL);
进样量:1μL;
流动相A:A含0.1%TFA的蒸馏水溶液,B含0.01%TFA的乙腈溶液;
梯度:0~2.5minB从10%增加到70%;
流速:1mL/min (~700bar);
HPLC仪器:1290Infinity系列;
检测:紫外,280nm。
4.安捷伦ZORBAX RRHD 300-Diphenyl色谱柱色谱条件
样品:核糖核酸酶A、细胞色素C和溶菌酶(3mg/mL);
进样量:1μL;
流动相A:A含0.1%TFA的蒸馏水溶液,B含0.01%TFA的乙腈溶液;
梯度:0~2.5minB从10%增加到70%;
流速:1mL/min (~700bar);
HPLC仪器:1290Infinity系列;
检测:紫外,280nm。
5.安捷伦ZORBAX RRHD 300SB-C18和300-Diphenyl色谱柱色谱条件
样品:核糖核酸酶A、细胞色素C和溶菌酶(3mg/mL);
进样量:1μL;
流动相A:A含0.1%TFA的蒸馏水溶液,B含0.01%TFA的乙腈溶液;
梯度:0~2.5minB从10%增加到70%;
流速:1mL/min (~700bar);
HPLC仪器:1290Infinity系列;
检测:紫外,280nm。
走进PONY谱尼测试
PONY谱尼测试是服务网络遍及全国的大型综合性检测机构,总部位于中国北京,下设上海、深圳、天津、青岛、武汉、宁波、广州、苏州、香港公司,共拥有8个大型实验室基地及几十个联络处。PONY谱尼测试共设健康与环保、贸易符合性、商品质量鉴定、安全保障4个独立事业部,旗下包括食品实验室、环境实验室、水质实验室、土壤实验室、电子实验室、可靠性实验室、玩具纺织实验室、汽车实验室、电池实验室等40余个实验室,业务范围遍布全国。
自2002年成立至今,经过10年的发展,PONY谱尼测试已成为中国最具市场竞争力的民营检测机构之一,在综合检测能力、服务范围、研发能力、销售收入等方面,在国内民营检测机构中居于领先地位。
隶属于健康与环保事业部的PONY谱尼测试食品实验室,具备CMAF食品检验机构资质,是国家农业部绿色食品、无公害农产品及农产品地理标志产品品质鉴定认可检测机构,国家认监委授权认可的首批有机产品认证检测机构,长期承担农业部、商务部绿色食品、绿色中药的分析检测,以及食品安全、中药中有害物质研究等相关科研课题。
PONY谱尼测试食品实验室自2008年就开始协助工商局对流通领域食品进行质量安全抽检,抽检任务包括年度抽检、节假日抽检以及应急风险监测抽检等,并多次承担工商应急风险监测任务。2008年成为北京奥运期间食品安全应急预案监测实验室。迄今,PONY谱尼测试食品实验室已得到全国百余家工商局的认可,承担着各工商局委托的流通环节食品安全抽检任务;并已得到多家城市食安办的认可,为其食品安全监督工作提供检测技术服务。2009年成为中国《食品安全法》颁布后国家认监委首批公布的食品检验机构。
PONY谱尼测试食品实验室的长期合作企业包括农产品生产加工企业、乳品企业、休闲食品企业、快餐企业、饮料企业等各领域知名客户,凭借丰富的检测经验和可靠精准的检测数据,PONY谱尼测试的品牌得到了合作伙伴的广泛认可。
检测能力
PONY谱尼测试食品实验室能够开展经CMA、CMAF、CNAS认可的几百项检测项目,可提供对各类食品、农产品、食品接触及包装材料等提供微生物、农残、兽残、添加剂及非食用物质、重金属、营养成分(营养标签)、功效成分等项目的检测服务。
PONY谱尼测试食品实验室拥有一支专业技术突出、管理水平先进、服务质量卓越、充满活力的优秀团队,汇聚了大批的科研专家和技术人才。实验室配置了功能覆盖广泛的实验室硬件设施,拥有大量国际知名厂商生产的各类仪器设备,包括:气相色谱/质谱联用仪、气相色谱仪、超高效液相色谱/质谱联用仪、高效液相色谱仪、离子色谱仪、电感耦合等离子体发射光谱仪、原子吸收光谱仪、分子荧光仪等数百台套,可全面满足食品领域检测要求。实验室采用国际一流的质量管理体系,全面涵盖标准管理、设备管理、标准物质管理等各个方面。
PONY谱尼测试食品实验室参与了十多项国家标准及绿色食品标准的制定工作众多,其中有多项已经正式实施或通过审定即将实施。公司拥有11项已授权专利技术和17项已申请尚未授权的专利技术,国内领先的检测技术水平和研发创新实力为谱尼未来业务的快速发展,以及持续保持市场领先地位提供了重要保障。
特色服务
PONY谱尼测试食品实验室强大的研发团队为实验室提供了有力的技术支撑和保障,能快速研发出市场急需的或有较高开发难度的检测方法,以便快速占领市场先机,并且可以持续更新优化现有检测方法,以提高工作效率,降低检测成本。
PONY谱尼测试食品实验室具有的特色是其拥有一套高效快速的应急风险监测系统,通过筛查国内、国际、已知的和研究发现的食品安全危害预警信息建立预警数据库,定期研究和筛选,提取相关信息,编写专业资讯速递与分析文件,通过客服渠道寄发,为客户完善预警机制给予卓有成效的帮助。
2008年10月,在“三聚氰胺”事件发生不久,PONY谱尼测试食品实验室迅速建立三聚氰胺快速检测通道,为乳品企业提供了及时高效的检测服务。在国家质检总局公布的首批《可检测“三聚氰胺”的食品检测机构名录》,PONY谱尼测试成为该名录中,唯一一家同时有两地实验室(北京总部食品实验室和上海食品实验室)入选的第三方检测机构。
2012年4月,央视曝光了多家药企涉嫌使用工业明胶制作胶囊壳的“毒胶囊”事件,由此引发了公众的强烈关注和焦虑,国家食品药品监管局在全国范围内对药用明胶和胶囊生产企业进行了全面排查,相关监管部门、监察部门启动了最为严格的查处行动。作为拥有明胶中铬含量检测专业资质的第三方检测实验室,PONY谱尼测试食品实验室迅速作出应急反馈,推出了针对明胶原料、空心胶囊、明胶食品添加剂及其他含明胶食品的检测服务,为维护药品安全、保障人民群众健康贡献了自己的一份力量。
发展目标
PONY谱尼测试发展的10年,也是中国经济突飞猛进的10年,中国各类行业的迅猛发展,在给公司带来不断增长的市场需求及份额的同时,也对PONY谱尼测试食品实验室的实验产能、硬件设施、人才储备、研发经费等方面提出了更多考验。
今后,随着政府部门对食品、药品、保健品等持续加大的监管力度,PONY谱尼测试食品实验室将进一步发挥自身技术优势,持续增加资金和人力资源投入,并配置更多高端仪器设备,紧跟各行业科学技术的发展趋势,根据市场需求不断开辟新的检测领域,推出更多检测项目,不断提升检测机构自身的技术与服务水平,保持在食品检测市场中的竞争力。
PONY谱尼测试食品实验室将继续以保障公众健康,守护食品安全为己任,秉承“以客户需求为中心,为客户提供全面优质的检测服务和解决方案”的服务理念,为实现将PONY谱尼测试打造成为全球最富竞争力的国际一流综合性检测服务集团的愿景,付出不懈努力。
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