对于食品安全现场快速检测来说,消除样本杂质的干扰非常关键。常用的消除样本杂质干扰的方法有稀释、使用掩蔽剂和分离。“稀释”和“使用掩蔽剂”操作简单,但分别存在检测灵敏度降低、有的项目筛选不到针对性强的掩蔽剂的不足;“分离”可以得到很高的样本纯净度,但操作复杂、耗时长,用于食品安全现场快速检测并不是非常理想。去干扰样本预处理微柱利用了固相萃取柱和离子交换柱原理,可以有效消除样本杂质干扰。
去干扰样本
预处理微柱的原理和特点
样本通过柱子的填料层时,颗粒状物质、糖类、蛋白等全部或部分被截流,而被检靶分子则通过填料层,并且浓度不发生改变。去干扰样本预处理微柱与固相萃取柱的外观、结构类似,但具体的操作、目的不同(见表1)。
去干扰样本预处理微柱的使用
去干扰样本预处理微柱的使用(见图1):①将微柱头没入液体样本中,缓慢拉动活塞柄,在上升到所需体积后将微柱头从液体样本中取出,然后继续缓慢拉动活塞柄使微柱头中的样本完全进入填料中。②缓慢推动活塞柄,收集样本于小试管或反应管中。另外,也可以采用将液体从上端加入微柱的操作方式(见图2):①向柱体中加入样本。②装入活塞。③轻推活塞柄,收集样本于小试管或反应管中。
去干扰样本
预处理微柱的具体应用
去除肉制品中亚硝酸盐检测时色素干扰
肉制品中亚硝酸盐检测是利用生成的紫红色沉淀进行判断,因而肉制品中的
血色素、添加色素都会影响结果的判断。采用聚酰胺粉去干扰样本预处理微柱可将肉制品中的色素吸附到聚酰胺粉,排除色素干扰,提高检测灵敏度和准确性。
为胶体金试纸条检测尿液
莱克多巴胺筛选最佳样本处理条件
用胶体金试纸条检测莱克多巴胺时经常会因尿液杂质干扰而使检测灵敏度降低,用去干扰样本预处理微柱可为其筛选最佳样本处理条件。具体流程为:①用多种填料制备去干扰样本预处理微柱。②筛选对莱克多巴胺吸附性差的填料。配制一定浓度(视试纸条检测灵敏度而定,如20ppb)的莱克多巴胺PBS溶液,用去干扰样本预处理微柱处理后用试纸条(生产数条试纸条备用)检测,阳性结果对应的微柱初步入选。④筛选对杂质吸附能力强的填料。用初步入选的微柱处理阴性尿液样本后用试纸条检测,阴性结果对应的微柱进入第二轮。⑤用进入第二轮的微柱处理不同的阳性尿液样本(添加不同量的莱克多巴胺),用试纸条检测灵敏度是否达到应用要求。必要时可重复以上流程或合并有效的填料,直到获得最佳条件。去干扰样本预处理微柱包括填料、柱体、筛板等。填料是微柱的核心,凡是有吸附和过滤作用的填料均可选择。柱体和筛板也是微柱必不可少的部分,逗点生物可根据样本量的大小为用户提供除填料以外的全套工具。去干扰样本预处理微柱技术是一个灵活性很大的技术,在食品安全现场快速检测方面必将得到广泛的应用。